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荧光染料EB染色的优缺点
吸入有极高毒性。刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。可能有不可逆后果的危险。
EB染料 EB属于核酸分子嵌入剂,通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中,特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。
优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸(DNA或RNA)。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小,所以其荧光产率也相对较低。事实上,大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。
细胞核用什么试剂染色因为有很多方法,请列举试剂名称
1、苏木精。这是至今为止最优良的细胞核染色剂,优点是几乎所有植物的任何组织中的细胞核都能被它强烈染色。苏木精本身不是染料,起作用的是他的氧化产物苏木精素,依靠硫酸铁按或硫酸铝按等媒染剂来染色。
2、醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在“观察植物细胞有丝分裂”(即“观察根尖分生区组织细胞”)时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
3、GoldView染料 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,也可用于RNA染色。
4、甲基绿和吡罗红。甲基绿将DNA染成绿色,吡罗红将RNA染成红色。将它们混合后给细胞染色,细胞核内被染成绿色,细胞质中被染成红色。因为DNA主要分布在细胞核,RNA主要分布在细胞质。
5、对细胞核染色主要是对染色体染色,染料有以下常用试剂:龙胆紫:染成紫色 ,醋酸洋红:染成红色 甲基绿: 绿色 。
6、碘液染色细胞时,主要染上的是遗传物质。细胞核、细胞质、线粒体、叶绿体中都含有遗传物质,所以都能被碘液染上颜色。其中,细胞核染上的颜色最深。因为细胞核中所含的遗传物质最多。注意,动物细胞没有叶绿体。
常见细胞核荧光染料
1、碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。
2、GoldView染料 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,也可用于RNA染色。
3、最常用的染料有FITC和藻红蛋白类(PE)及罗丹明等。
4、DAPI为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
5、DAPI染核。建议用DAPI染核PI是一种标记核酸的染料,通常用于标记DNA。但PI也能够结合RNA并产生荧光,常见为胞浆内的红色荧光。
为什么细胞核中某一结构能被碱性染料染上较深颜色?
细胞核中能被碱性染料染成深色的物质是染色质,是DNA和蛋白质的复合体。
而这种碱性蛋白质是染色体可以被染色的基础,在细胞质中,碱性蛋白表面携带大量的负电荷,因此可以被含有携带正电荷的助色基团的染料染色。在化学领域,一般称助色基团带正电荷的染料为碱性染料,和染料自身的PH值无关。
因为细胞核中有染色质。染色质之所以叫染色质,是因为它容易被碱性染料染上颜色而得名,细胞中的其他细胞器都没有染色质容易被染上颜色。
选2 染色质 ①特性:细胞核中易被碱性染料染成深色的物质。②组成:主要由DNA和蛋白质构成。
直接染料(简单易用的染色方法)
棉、麻、粘胶可以用直接染料、活性染料丝、毛可以用酸性染料、活性染料。淘宝可以买单件衣服所用的小包染料。卖家可以根据你提供的衣服面料和重量,给你推荐相关染料和用量。
【5】 硫化染料 硫化染料不溶于水,但能溶解在硫化纳溶液中,还原成隐色体,隐色体被棉纤维吸收后,氧化成不溶性染料而固着在棉纤维上。
因此,采用立式星形架染色机进行浸染较为妥当。羊毛与粘胶混纺织物的浸染直接染料用于羊毛粘胶混纺织物的染色有两种方法。一种是选用羊毛和粘胶可染得相同色泽的染料。
黑色染料一小包固色剂一小瓶。某宝大都是直接染料,操作比较简单。食用盐一包。热水若干(95度左右)。全棉或以棉为主的混纺衣服一件。其它材质用这种方法上色困难。染色前衣服要洗干净用热水浸湿备用。
现在常用的核酸染料有哪几种
1、常用的核酸染料有:EB(溴化乙锭)是高度灵敏的嵌入性芳香族荧光化合物,为强致癌诱变剂,但价格便宜,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。
2、dna染料有,溴化乙锭,具有灵敏度高、价格便宜、操作方便等优点。SYBR系列,具有更高的灵敏度和更低的背景荧光。GelRed系列,是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂。
3、【答案】:(1)指示剂:在电泳过程中,常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程。核酸电泳常用的指示剂有两种:溴酚蓝(bromophenol blue,Bp),呈蓝紫色;二甲苯青(xylene cyanol,Xc),呈蓝色。
4、个人建议使用biotium的gelred核酸染料,因为目前就是gelred是安全无毒的,其他的都有毒,有致癌风险。
5、因此,亚甲基蓝被广泛应用于核酸电泳分析、核酸染色和细胞核染色等实验中。值得注意的是,亚甲基蓝虽然是一种常用的核酸染料,但由于其对生物体具有一定的毒性,因此在实验中需要注意安全使用。
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