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DNA电泳,用什么核酸荧光染料效果好,毒性低
GoldView染料 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,也可用于RNA染色。
绿色荧光核酸染料 绿色荧光核酸染料对于大片段DNA的染色效果良好,但是在对于500bp以下的片段效果不是很好,还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭,一般5-10min条带就会消失。
实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭(EB)。染色效果好,操作方便,但是稳定性差,具有毒性。注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长,如果激发波长不对,条带则不易观察,出现条带模糊的现象。
gelred 是目前市场上最好的核酸染料,号称无毒,而且耐热,无背景荧光,但是加入量多容易引起拖带,当然价格也挺贵的。除此之外,国内有些不良商贩,拿AO(丫叮橙)做EB替代品,是剧毒致癌物质,且实验效果也不如EB。
r-pe和pe荧光染料颜色
pe荧光呈红色荧光。PE是从红藻中分离纯化获得的一种常见染料,经激光激发后发出橙黄色荧光,zui大发射波长为575 nm。PE具有吸光性能好和光量子产率高的特点,可用于标记表达水平较低的蛋白。
最常用的染料有FITC和藻红蛋白类(PE)及罗丹明等。
FITC的发射波长为525~530nm,呈黄绿色荧光。PE的发射波长为578nm,呈红色荧光。RB200的发射波长为595~600nm,呈橘红色荧光。
)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:紫红色粉末,吸收550nm,发射光620nm,橙红色荧光。4)镧系:Eu、Tb5)PE:吸收光490~560nm,发射光595nm,红色荧光。
红色:如荧光素异硫氰酸物(Rhodamine)和吩咐若汞(PE)等标记的一些抗体,激发波长在532纳米至568纳米之间。
免疫分析中常用的荧光染料与标记染色
1、常用的荧光染料有荧光绿B(EGFP)、荧光红(DsRed)、荧光黄(YFP)、荧光紫(CFP)、荧光橙(CFTR)等。资料扩展:荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。
2、常用荧光二抗的颜色主要有青色、绿色、红色、紫色等,具体如下:青色:如荧光素同型免疫球蛋白(FITC)等标记的一些抗体,激发波长在488纳米左右。
3、免疫荧光红色和绿色是在细胞或组织中使用荧光标记物进行染色的技术,用于生物、医学和免疫学领域的研究和诊断中,红色和绿色荧光指的是标记物发出的荧光颜色。标记物是荧光染料、荧光蛋白或抗体所结合的荧光物质。
4、具有更高的灵敏度和特异性。同时,双染法也可以用来确定蛋白质或抗原的相对位置和相互作用关系。其中,免疫荧光单染是指用一种荧光染料标记一种抗体或蛋白质,而双染则是将两种抗体或蛋白质分别用不同的荧光染料标记。
CFSE标记活细胞的特点的介绍
1、CFSE是晶体场稳定化能的意思 晶体场稳定化能 crystal field stablization energies(CFSE)若d轨道不是处在全满或全空时,d电子分裂轨道后的总能量低于分裂前轨道的总能量。这个总能量的降低值,称为晶体场稳定化能。
2、CFSE进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时,CFsE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。
3、其特性如下:高效性:用酶作催化剂,酶的催化效率是一般无机催化剂的10^7~10^13倍。专一性:一种酶只能催化一类物质的化学反应,即酶是仅能促进特定化合物、特定化学键、特定化学变化的催化剂。
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