好久不见，今天给各位带来的是用hoechst33342染料染色步骤，文章中也会对hoechst染色33342染色步骤进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！
求助hoechst33258染色步骤
1、经过紫外光激发后发出蓝色荧光。如果你是用来染培养的细胞的话，可以参考下面的步骤（切片雷同）：细胞涂片：甲醇：冰乙酸（3：1）固定15分钟，PBS洗一次，加Hoechest 33258荧光染料37℃孵育15~30分钟，于荧光显微镜下观察。
2、配制Hoechst 33258染色工作液：按Hoechst 33258浓缩液(50×)：Hoechst Buffer=1：50的比例混合，即为Hoechst 33258染色工作液。
3、吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
4、blue）可将RNA染成蓝色，但灵敏度不高，而且操作时间长。染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝，10mmol/L Tris-Ac（pH3），4℃放置1~2h，用净水洗5~8h（反复换水），带型肉眼可见，最低检测量为 250ng。
流式细胞仪结果图解读_流式细胞仪技术
1、流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。
2、流式细胞仪构成：流体部分，光学部分，电子部分。
3、流式细胞仪，就是将检测器换成了光电系统，此时，就不用人眼去观察，而用这个检测系统来进行检测。它可以分析细胞表面的一些抗原的表形，而且还可以分析细胞内的一些抗原以及抗体的表形。
4、 (一)单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析，形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同，横坐标可以是线性标度或对数标度。
hoechst33342和其他染料一起染色的时候顺序
1、不仅可单独使用，也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
2、Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20mg/ml。01 用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10微克/毫升。
3、常用的荧光染料：丫啶橙、 PI 、DAPI、Hoechst33258 和Hoechst3334EB等Hoechst 3334Hoechst 3325 DAPI三种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
4、DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
请问用hoechst33258可以和PI进行双染可以吗?
不仅可单独使用，也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
Hoechst 33258 可被活细胞摄取，与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。
)PI双染色法基本原理Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，能进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高。DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。
④进行双标记沉淀时，应尽量选用激发光谱不接近的荧光色素。 以溴化脱氧尿嘧啶(Brdu)和Hoechst33258染料进行细胞周期分析。 (1)试剂： 用培养基配制33 mg/L Brdu及脱氧细胞苷24g/mL。
博凌科为解需要吸出培养液。用PBS洗2次后再加入染料。Ho染色30-45min，PI染色5-10min左右。
都是染核的染料，结果应该差不多，不过一般我们作不出那么典型的图片。可是你那张图也实在不太象细胞核。
油红o染色后怎么看含脂滴的肝脏细胞
1、材料：油红染料 棕色可密封瓶 异丙醇 研钵 漏斗 定性滤纸 称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。
2、肝细胞内的脂肪滴呈红色，细胞核呈蓝色。 图 肝脂肪变性：脂肪滴呈红色，细胞核蓝色。
3、形态上 脂肪变性：光镜下，脂滴表现为大小不等的近圆形空泡（因制作组织切片时脂肪被有机溶剂溶解所致），可疑脂肪变性时应进行脂肪特殊染色加以证实。电镜下，细胞胞浆内的脂肪表现为脂肪小体，进而融合成脂滴。
4、在实验过程中，油红O作为一种脂溶剂和染脂剂，比较容易和甘油三酯结合出现小脂滴状，和磷脂结合力较差。通常，将油红O与细胞或组织进行共孵育，然后使用蒸馏水洗后水溶性封片剂封片，最后在普通白光显微镜下观察并拍照记录。
5、油红O染色脂滴发黑的原因可能是由于固定剂使用不当或者染色时间过长，导致脂滴被氧化或者沉淀。这可能会改变脂滴的化学性质，使其呈现不同的颜色。
怎样鉴定细胞凋亡
根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。
光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。
主要特征是：细胞变圆，染色质凝聚、分块，胞质皱缩。之后整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一些球形的突起，并在其基部绞断而脱落形成大小不等的内含胞质、细胞器及核碎片的凋亡小体，然后被周围细胞所吞噬。
，形态观察 坏死细胞：细胞膨胀，细胞质膜裂解，细胞器膨大，溶酶体破裂，水解酶释放到细胞溶质中使细胞内溶物分解导致细胞崩解，DNA随机断裂成不规则碎片，引起炎症。
所以可以用FITC偶联的annexinV鉴别凋亡细胞和活细胞。坏死细胞的PS也会从细胞膜的内表面翻转到细胞膜的外表面，annexinV也能识别坏死细胞表面的PS，所以 annexinV无法区分坏死细胞和凋亡细胞 。
到此，以上就是小编对于hoechst染色33342染色步骤的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。
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