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流式细胞术PI染色求助
PI 是 propidium iodide的缩写,该染料能和核酸链结合后,被激发发出荧光。其实并不是检测凋亡,而是检测的细胞膜的完整性。完整的细胞膜对PI没有通透性,PI不能进入细胞内和核酸结合,所以细胞不能被染色。
实验原理:流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。
染色特异性差,这个最常见于PI+anexin V 双染的情况。其实没有方法可以特异性的染坏死细胞,就认为PI阳性的是,其实只要细胞膜通透性增高,就会PI阳性,没有特异性。
因此,通过流式细胞术PI 染色法对细胞内DNA 含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/ G0 期,S 期和G2/ M 期,并可通过特殊软件 计算各时相的百分率。
死亡的细胞,一般PI染色时阳性的,但是其他的凋亡指标是阴性的。比如caspase的活性。加入caspase的荧光化底物,可以被染色的就是凋亡的细胞,而光PI阳性,但不被caspase底物染色的就是死亡的细胞。
拟南芥根部PI染色问题求解答
1、将MS上生长1W左右幼苗的根浸入PI染色液中染色10-15分钟即可置于共聚焦显微镜下观察。
2、是的。在pi染实验的时候,拟南芥的根是一个易于操作的模式器官,具有大多数细胞类型的标记,以及形态学定义的发育阶段。是有利于进行器官发育过程中的基因时空表达模式的研究。
3、醋酸洋红溶液。中学实验室染色剂常见有:龙胆紫,醋酸洋红溶液,苔盼蓝,健那绿染液。而根尖细胞轮廓实验的染色剂一般用醋酸洋红溶液。
4、PI浓度常规的是0.1-100ug/ml。可以直接用10ug/m先染色,如果染得太深或者太浅的话可以进一步调节。
5、四,根与根际有益(害)微生物。 文章回答了这样一个问题:拟南芥根系在面临损伤和病原菌侵染时,在单细胞水平如何激活下游的免疫响应。 对植物免疫响应来说,识别病原菌联系的分子模式(MAMPs)是至关重要的。
6、这个实验有几个问题:在FSC SSC这个图上没有看到明显的细胞群,有可能是PMT电压没有设置好,或者是细胞因为处理的太过,都死了,成为碎片。
[2020春假]植物根系利用细胞损伤“门控”机制调节自身免疫响应_百度...
可经叶片、幼枝、芽、根系和种子进入植株体内,其作用机理是抑制植株体内赤霉素的生物合成,它的生理功能是控制植株的徒长。
健康饮食 想要提高免疫功能的人需要讲究饮食的合理化,现在很多人总是不注意饮食,在不当饮食的影响下身体健康容易受损,甚至有抵抗力下降的趋势。
识别和清除外来入侵的抗原,如病原微生物等。这种防止外界病原体入侵和清除已入侵病原体及其他有害物质的功能被称之为免疫防御。使人体免于病毒、细菌、污染物质及疾病的攻击。
PI单染色法的PI介绍
1、Calcein -AM本身并不是荧光分子,但通过活细胞内的酯酶作用,Calcein -AM能脱去AM基,产生的Calcein能发出强绿色荧光(激发:490 nm,发射:515 nm)。
2、PI综合染液不能用蒸馏水配,否则细胞全部溶解,造成结果不可靠;4℃过夜一般隔天就进行检测,如果想推迟几天测,那就保存在-20℃,有资料显示-20℃可以至少保存一个月;70%~75%的酒精都可以用于PI单染固定。
3、PI单染色法原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。
4、PI单染用FL2通道检测,若与FITC或PE标记抗体/蛋白联合使用FL3通道检测。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基对之间实现与双链DNA结合。
5、PI 是 propidium iodide的缩写,该染料能和核酸链结合后,被激发发出荧光。其实并不是检测凋亡,而是检测的细胞膜的完整性。完整的细胞膜对PI没有通透性,PI不能进入细胞内和核酸结合,所以细胞不能被染色。
小伙伴们,上文介绍pi染料染色植物根的内容,你了解清楚吗?希望对你有所帮助,任何问题可以给我留言,让我们下期再见吧。