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染色剂染好细胞还可以存活

欢迎进入本站!本篇文章将分享细胞染料染色需要固定吗,总结了几点有关染色剂染好细胞还可以存活的解释说明,让我们继续往下看吧!

丫啶橙染色是否需要固定

通过化学染料吖啶橙(acridine orange,AO)染色木犀草素处理后的HepG2细胞判断木犀草素是否诱导HepG2细胞发生自噬。

染色剂染好细胞还可以存活-图1

吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。

但吖啶橙的染色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。

.固定:手执玻片一端,有菌膜的一面朝上,通过迅速通过火焰2-3次(用手指触涂片反面,以不烫手为宜)。4.染色:加适量(以盖满菌膜为度)结晶紫染色液(或石炭酸复红液),染l~2min。

碘染色法吉姆萨染色:衣原体 乳酸酚棉蓝染色,糖原染色:真菌,前者适用于所有真菌,呈蓝色。吉姆萨染色,瑞氏染色:鞭毛虫,滴虫,锥虫,疟原虫,弓形虫,隐孢子虫等原虫。三色染色,碘染色:阿米巴等原虫。荧光素吖啶橙染色:疟原虫。

染色剂染好细胞还可以存活-图2

测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定吗

用流式检测细胞凋亡的方法很多种,有些需要固定,有些不能固定的。根据方法而定,不能一概而言。如果是测细胞内抗原的,比如抗体识别活化caspase-3, 那就要固定。其他检测功能的,比如caspas3-3活性的,就要活细胞来测试。

对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的 DAPI 染色。

做Annexin V及PI染色不能够固定细胞。因为固定的实验操作实际上会杀死细胞,所以不能够用于关于细胞调亡的检测。经过固定的细胞,将会对Annexin V和PI同时呈现强染色,给你假阳性结果。所以你的时间点多也只好辛苦一点了。

livedead染色需要固定吗

不过对于一些胞内抗原(细胞因子、转录因子),由于需要固定、破膜,所以上述染料中,除了一些胺类染料(如Live/Dead、Ghost等)和新型蒽醌类染料CyTRAK Orange外,其它染料不再适合此类标本的细胞死活鉴别。

染色剂染好细胞还可以存活-图3

于接种后第3天角膜上皮细胞在细菌纤维素膜上贴壁达到融合时加入10ml含5μl钙黄绿素-AM+20μl溴乙非啶同二聚体的无菌PBS(LIVE/DEAD细胞活性毒性检测),评估2种培养法细胞的活性率。

因此,采用FDA/PI双染色法,利用死细胞染色后会激发不同波长的荧光的特点,可以区分死细胞和活细胞,即活细胞可以检测到FDA产生的荧光信号,而没有P产生的荧光信号的死亡细胞则相反。

革兰氏染色必须过火固定吗,自然干可以吗?

1、涂片后不宜用火焰烤干,宜自然干燥;若经火焰固定时,应以不烫手为度,以免菌体受损,致使染色反应不准。

2、晾干:让涂片在空气中自然干燥。固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1分钟。水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。

3、革兰染色步骤中,干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥,但勿靠近火焰。固定:常用高温进行固定。即手持载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次,共约3~4秒。

微生物实验中为什么细菌在染色前需要固定?

在细菌染色过程中,固定的操作是快速将载玻片通过火焰2-3次,其目的是让细菌细胞膜贴玻片部分局部蛋白质变性,从而固定于载玻片上而不易被染液或水冲掉。

杀死细菌。根据《临床医学检验临床微生物》书中得知,细菌染色过程中固定的作用主要是杀死细菌。细菌是一种单细胞生物。外形一般为球形、杆形或螺旋形,通常以二分裂方式进行繁殖的原核生物。

主要是为了使微生物牢固地结合于玻片上,在染色过程中不容易被冲洗掉。此外固定还有杀死微生物的作用。微生物包括:细菌、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体以及病毒,它个体微小,与人类关系密切。

防止染色玻片的固定松动。细菌染色过程中固定的主要目的是防止染色玻片的固定松动,以防止滑落。

对细菌涂片加入固定,最主要的目的就是让细菌样品附着在波片上,这样后续的染色和冲洗也就不会让样品脱落。

各位小伙伴们,我刚刚为大家分享了有关细胞染料染色需要固定吗的知识,希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决,欢迎随时提出哦!

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