荧光染料染色技术特点（荧光染料染色技术特点）-义乌市坤敦电子商务商行

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用荧光染料EB染色的原理和优缺点

溴化乙锭(EB)是一种荧光染料，这种扁平分子可以嵌入核酸双链的配对的碱基之间，在紫外线激发下，发出红色荧光。

EB染料 EB属于核酸分子嵌入剂，通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中，特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。

至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低。SYBR Green和SYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多。

EB的染色原理是能够嵌入到dsDNA的大沟之中，形成复合物而在紫外光下发出荧光。引物是ssDNA，如果不能形成二级结构的话，EB是不能有效染色的。

博凌科为解 1．原理溴化乙啶(ethidium bromide，EB)是最常用的嵌入性荧光染料，活细胞或固定细胞均能从极稀溶液中摄取EB染料，DNA螺旋暂时弯曲允许EB荧光染料嵌入大分子疏水中心的碱基对之间。

1、dapi染色原理如下：DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对细胞核染色。

2、DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

3、因为DAPI可以透过完整的细胞膜，DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

4、DAPI染色原理，它是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。

5、DAPI染色不能区分活死细胞，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。活细胞死细胞都能够被DAPI染色，所以光看到蓝色荧光，无法区分。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。

6、核定位的蛋白做免疫荧光需要dapi染色。1．实验原理免疫染色的实验原理类似于Western Blotting，两者都是运用抗体的特异性识别作用来显示目的蛋白，但是由于免疫染色需要在原位进行，而且蛋白没有经过富集，因此其实验难度较高。

在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

【答案】：(1)指示剂：在电泳过程中，常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程。核酸电泳常用的指示剂有两种：溴酚蓝(bromophenol blue，Bp)，呈蓝紫色；二甲苯青(xylene cyanol，Xc)，呈蓝色。

要注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长，如果激发波长不对，条带则不易观察，出现条带模糊的现象。其好处是染色效果好，操作方便，但是稳定性差，具有毒性。

GoldView染料 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，也可用于RNA染色。

各位小伙伴们，我刚刚为大家分享了有关荧光染料染色技术特点的知识，希望对你们有所帮助。如果您还有其他相关问题需要解决，欢迎随时提出哦！