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he染色的基本原理是什么?嗜酸性?嗜碱性?
如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
HE染色法是石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。
HE染色原理 HE 染色法为苏木精-伊红染色法,是石蜡切片技术里常用的染色法之一,也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法。
苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛技术方法。
细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料苏木素亲和力较强,而细胞浆则相反,它含有碱性物质与酸性染料伊红亲和力较大。
HE染色就是说用伊红和苏木清(两种化学试剂)的混合物对细胞染色,这是组织胚胎学最常用的染色方法,嗜酸性的就是红色,嗜碱性的就是蓝色。一般情况下细胞核是嗜碱性的,所以是蓝色;细胞质是嗜酸性的,所以是红色。
为什么碱性染料可以给染色体染色
1、能与组织或细胞中呈酸性的物质或结构(如核酸形成的染色体)发生化学结合或吸附作用,使其染上一定颜色的染料;常用于植物细胞核染色的碱性染料有:龙胆紫、洋红等,一般都溶解于醋酸中使用。实质上龙胆紫溶液呈弱酸性。
2、它们的存在使染料物质离子化,极性增强,促进染料与组织间发生作用,产生染色效果。我们把助色基团中具有酸性或碱性基团的染料分别称为酸性或碱性染色剂。
3、pH值大约在2—5之间,故在中性、碱性或弱酸性溶液中,菌体蛋白质电离后带阴电荷;而碱性染料电离时染料离子带阳电。因此,带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。
4、首先,观察染色体行为一定要保持细胞的活性。用碱性颜料可以在不影响的情况下观察到 酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。
5、碱性染料。碱性染料不是天生的,常用的碱性染料有龙胆紫和 醋酸洋红。染色体叫染色体是因为它可以被染色,而不是一直染着色的。在我们细胞中,染色体是没有颜色的,不染色是看不见的。
单染色法的基本步骤有哪些?有何注意事项
离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。 离心弃去固定液,3mlPBS重悬5min。 400目的筛网过滤1次,500—1000r/min离心5min,弃去PBS。 用1ml PI染液染色,4℃避光30min。
按照不同染料的要求,结合所观察的内容确定染色时间,染色时间到达时,进行水洗,干燥等步骤。最后得到的玻片加盖盖玻片即可进行镜检。如有需要可以后续再进行油封、蜡封等封片过程。
实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。
he染色的操作步骤
1、he染色的基本步骤如下:石蜡切片脱蜡至水。依次将切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。苏木素染细胞核。
2、实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。
3、因此,切片在染色前经脱福尔马林色素的步骤。其方法:切片脱蜡,浸水后,投入伟勒卡依氏溶液(1%氢氧化钾液1ml,75%酒精200ml)20分~2h,充分水洗后染色。
微生物染色的微生物染色的基本原理
霉菌的制片和简单染色的基本原理是: 制片:将霉菌培养在培养基上,待其生长到一定程度后,取少量菌落,涂抹在玻璃片上制成制片。
原理:使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见的细菌大几倍甚至几十倍,因此,不必染色即可用显微镜观察其形态。
单染色法 基本原理. 编辑. 所谓单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。. 此法操作简便,适用于菌体一般形态的观察。. 在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,所以常用碱性染料进行染色。
细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色。
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