琼脂糖配什么染料染色好,琼脂糖加多少核酸染料 -义乌市坤敦电子商务商行

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琼脂糖mix带溴酚蓝可以显色吗

【答案】：(1)指示剂：在电泳过程中，常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程。核酸电泳常用的指示剂有两种：溴酚蓝(bromophenol blue，Bp)，呈蓝紫色；二甲苯青(xylene cyanol，Xc)，呈蓝色。

溴酚蓝是一种常用的电泳指示剂，用于观察琼脂糖凝胶电泳过程中的染料移动情况。能够在紫外光下发出蓝色荧光，可以清晰地观察到染色后的凝胶中的带状物。

溴酚兰起染色的作用在紫外灯下直接观察检测观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。

可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker，marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。

制备凝胶的时候可以加入eb的如果选择电泳后染色，只要找一个大的培养皿之类的容器，加入eb稀释液，将凝胶放入即可。

根据查询相关资料信息显示，loadingbuffer的中文名字叫上样缓冲液，6*的缓冲液中可以显示两条带，前面的紫色的条带是溴酚蓝，代表的片段大小是300bp，后面的有点绿色的条带是二甲苯青，代表的片段大小在4000bp左右。

凝胶加载染料，紫色（6X）是NEB的主要凝胶加载染料，适用于尖锐，紧密的条带。无紫外线阴影。包含 Ficoll，用于更明亮、更紧密的表带。含有EDTA以阻止酶促反应。与琼脂糖和非变性聚丙烯酰胺凝胶相容。

实验室常用的核酸染色剂是溴化乙锭（EB）。染色效果好，操作方便，但是稳定性差，具有毒性。注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长，如果激发波长不对，条带则不易观察，出现条带模糊的现象。

跑胶的时候，可以用4微升RNA溶液加2微升loadingbuffer。保证RNA的浓度在150到300纳克每微升，这时所得到的条带会比较清晰。跑胶的时间可以适当延长一些。

作为指示剂，因为溴酚蓝呈蓝色，而蛋白质是白色，在SDS-凝胶中不明显，且溴酚蓝的相对分子量比蛋白质(绝大部分)小，电泳时速度比蛋白质稍快，因此当溴酚蓝到达电泳槽底部(可看蓝色调带)，则电泳结束。

另外溴酚蓝有示位的作用，一是可以看到样品加到了胶里（蓝色），还有胶孔内样品的高度；二是在跑胶过程中表示跑的程度。

在琼脂糖凝胶中溴酚蓝（BromophenolBlue）约与300bp的双链线状DNA的迁移速度相同。二甲苯腈蓝FF则与4kbp的双链线状DNA的迁移速度相等。

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