eb染料电泳中染色注意事项（eb染料电泳中染色注意事项是什么）-义乌市坤敦电子商务商行

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荧光染料EB染色的优缺点

最终激发EB发射出波长为590nm的可见光谱红橙区的红色荧光，发射波长为605nm.EB染色的缺点及注意事项切勿吸入粉尘。不慎与眼睛接触后，请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。穿戴适当的防护服、手套和护目镜或面具。

优点是：（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。

由于各种染色方法灵敏度的不同并且不同类型的蛋白质对不同的染色方法有特异性，所以各种染色方法都有优缺点。

1、染色分快染和慢染，快染做法是先用染色液进行染色1h左右，如果嫌麻烦就在微波炉里加热30s，再染30分钟左右的样子就可以了，然后进行脱色，1小时内更换三次脱色液，基本就可以清楚的看到条带了。

2、染色时间不要过长，如果是一两块胶2分钟足够了，如果有很多胶要染色，建议分批次染色。脱色时可以用脱色液，也可以直接用去离子水，事实上去离子水里加一点乙醇就可以了，不需要配置很麻烦的脱色液。

3、是。SDS电泳完毕后，可以直接进行染色，但染色的时间长通常需要过夜染色，然后用高浓度脱色液脱色，再用低浓度脱色液脱色。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，简称SDS-PAGE是聚丙烯酰胺凝胶电泳中最常用的一种蛋白表达分析技术。

1、（3）电泳：(2)中的Buffer应完全浸没琼脂糖凝胶，在上样孔中加入Marker和样品，120V电泳（通常电泳时间在半小时以内）。注意，上样孔应在负极同侧。（4）显像：将电泳后的凝胶进行紫外成像，拍照记录。

2、EB染色。可选择制胶时加入EB（要在溶玩胶后，且温度至室温时（用手握住制胶容器，不烫手即可））；或电泳结束后，将胶放入EB溶液中染色。

3、goldview核酸染料作用是将DNA染色，跑完胶能看清楚。两者作用不同。所有都要用。现在最安全的就是gelred核酸染料。可以替代EB。美国做过相关细胞实验，EB等很容易进去细胞，但是gelred进不去。

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