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临床检验技师临检基础知识讲解:十五种细胞染色技术
甲基蓝:甲基蓝是弱酸性染料,能溶於水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。它跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
(1)纤毛柱状细胞:细胞呈锥形,顶端宽平,其表面有密集的纤毛,纤毛巴氏染色呈亮红色;胞质泡沫状,巴氏染色染蓝色,HE染淡红色;核圆形位于细胞中部,染色质细颗粒状。
涂片前准备工作 (1)保证标本新鲜,取材后尽快制片。(2)涂操作要轻巧,避免挤压以防止损伤细胞。涂片要均匀,厚薄要适度,太厚细胞堆叠,太薄细胞过少,均影响诊断。
金属沉着法:其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。
未干透血膜不能立即染色,否则染色时易脱落。
苏木精伊红染色(苏木伊红染色)
1、苏?(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法术里常用的染色法之一。苏木精染液为,主要使细胞核内的染色质和胞质内的核糖体着紫蓝色。伊红为酸性染料?,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
2、H-E染色是指苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining),是石蜡切片技术里常用的染色法之一。
3、苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。苏木素染色法指使用苏木素的染色法。
4、对人体无害,因此苏木精伊红染色原理没有毒。
HE染色的实验原理方法及注意事项
1、吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。注意事项:染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。
2、注意:苏木素染过可用盐酸分化使颜色变淡;伊红过染可用70%乙醇洗使颜色变淡。片子不可在空气中长时间暴露,会变黑,因此从二甲苯取出直接封片,不然会影响后面的拍照观察。
3、he染色的注意事项:切片脱水透明切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。
4、HE染色步骤:脱蜡,脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟,事先准备好盖玻片。覆水,100%(Ⅰ、Ⅱ)、90%、80%、70%酒精各5分钟,自来水冲洗5分钟×3。
HE染色原理及步骤
1、染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。
2、HE染色步骤:脱蜡,脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟,事先准备好盖玻片。覆水,100%(Ⅰ、Ⅱ)、90%、80%、70%酒精各5分钟,自来水冲洗5分钟×3。
3、HE染色法之所以成为细胞染色最常用的方法是因为HE染色法过程中除化学反应外,还有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核浆对比染色效果。
4、HE染色的实验原理及注意事项 细胞核染色原理: 苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。
5、拓展知识:其原理是利用特定的染料对细胞或组织中的不同成分进行染色,从而显示它们的形态和结构。
伊红和美蓝为什么能使细菌着色?
伊红-美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌,其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸,菌体带H+故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽,在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合。
伊红美蓝琼脂培养基是一种鉴别培养基,用以鉴别肠杆菌,尤其是大肠杆菌,因其有强烈分解乳糖产酸的能力,故可使菌体染上伊红,伊红和美蓝结合,是菌体染上深紫色,有金属反光。
(1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
苏木精伊红染色原理有毒吗
1、染色剂附着于细胞或细胞器表面,加深其颜色便于观察,但是染色剂对于细胞而言也有一定的毒性,会使得细胞失去其生命活性。染色即染上颜色,也称上色,是指用化学的或其他的方法影响物质本身而使其着色。
2、苏?(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法术里常用的染色法之一。苏木精染液为,主要使细胞核内的染色质和胞质内的核糖体着紫蓝色。伊红为酸性染料?,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
3、HE染色标本是HE染色法中石蜡切片技术里常用的染色法之一,脂滴和石蜡都是具有非极性有机物,因此很容易被融去。苏木素是一种碱性染料,使细胞组分中的酸性物质如细胞核染色体、细胞质中粗面内质网等细胞器呈现“蓝紫色”。
4、苏木精-伊红染色法,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
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