欢迎进入本站！本篇文章将分享h33342染料染色原理，总结了几点有关hoechst33342染色浓度的解释说明，让我们继续往下看吧！
该用多少浓度的HOECHST33342染活细胞的细胞核
该用多少浓度的HOECHST33342染活细胞的细胞核 测细胞凋亡，贴壁细胞dapi染色，最好是固定。DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。
(1)将细胞悬浮于HBSS中，浓度介于1×106～2×106/mL浓度之间。 (2)以悬浮细胞平衡盐溶液(HBSS)充满含鞘液的细胞贮藏池。 (3)设定细胞流量为500个/S(秒)，以获得最佳测定结果。
淡苏木染色1/5分钟，pbs漂洗(这一步不做也可，看试验需要，并且苏木素会把胞浆染红，如要显示核，hoechst33342也可以，浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上)。(8)甘油明胶封片(封片后可长期保存)。(9)显微镜观察。
主要是在体外将移植细胞以hoechst33342染色，而后植入体内。2周后取标本复查，荧光很好，而且非常密集；但4周后再检查的时候，荧光却踪影全无。我对这种现象很难解释。
DAPI和hoechst染色的区别
DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对细胞核染色。
EB染料 EB属于核酸分子嵌入剂，通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中，特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。
DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
hoechst33342和其他染料一起染色的时候顺序
1、不仅可单独使用，也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定。也能够与488 nm激发的荧光素如FITC和PE等联合使用。
2、常用的荧光染料：丫啶橙、 PI 、DAPI、Hoechst33258 和Hoechst3334EB等Hoechst 3334Hoechst 3325 DAPI三种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
3、在细胞周期分析时，在与细胞孵育过程加入Brdu，Brdu可替代DNA中的胸腺嘧啶，因此，处于合成期内的细胞表面上仍保持二倍体状态，并在分裂后G1峰的半峰处产生一新峰，此项 技术可用于直接测定细胞G2期及分裂时间。
4、DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
5、GelRed 和 GelGreen染料 GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
判断细胞死活的方法
区分死细胞和活细胞的方法有：①、活细胞能发生质壁分离而死细胞则不能。②进行培养，活细胞能繁殖，死细胞则不能。③、进行染色，死活细胞呈现不同的结果。④、直接观察细胞结构。
第用健那绿给细胞染色，如果能发现细胞不有被染色蓝绿色的线粒体，则该细胞是活细胞，否则就是死细胞。
能发生质壁分离，或细胞质能流动的是活细胞，否则是死细胞。细胞在一定浓度的外界有色溶液（红墨水）中，溶液变色，为死细胞（活细胞质壁分离流出的只有水，而没有细胞其他化合物），而死细胞不经解离就能被染色。
Hochest33258,Hochest33342有何区别
1、区别如下：Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为：C27H28N6O·3HCl·3H2O，分子量为6199。Hoechst 33258，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。
2、Hochest33258，Hochest33342两种染料都是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。所以hochest染色对细胞活性影响不大。其中33342比33258毒性低。
3、此外，由于全部细胞均经固定，因此不能区别死细胞和活细胞。Hoechst-PI染色则可弥补上述不足。Hoechst 33258 可被活细胞摄取，与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。
小伙伴们，上文介绍h33342染料染色原理的内容，你了解清楚吗？希望对你有所帮助，任何问题可以给我留言，让我们下期再见吧。
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