大家好呀！今天小编发现了冰冻切片荧光染料染色流程的有趣问题，来给大家解答一下，别忘了关注本站哦，现在我们开始阅读吧！
求大神支招染E-cadherin冰冻切片荧光染色,我的步骤是PFA固定15min,PBS...
取出组织冰块立即置入-80℃冰箱储存备用，或置于恒冷切片机冰冻切片。冰冻切片4~8mm，冰冻切片后如不染色，必须吹干，储存低温冰箱内，或进行短暂预固定后储存冰箱内保存。室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟。
组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。
当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后)，计时1~2分钟，然后将压力锅端离热源，冷水冲至室温后，取下气阀，打开锅盖，取出切片，蒸馏水洗后，PBS洗2分钟×3，下接免疫组化染色步骤。
拍完荧光的冰冻切片怎么保存
不会。 冰冻切片染色后置于-20度保存，保存时间最长能达到30天，因此冰冻切片染色十天不会变质。冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。
一般来说，冰冻切片应该存储在低温冰箱中，以保持其新鲜度和质量。根据您提供的信息，切片已经存放了一年，时间过长可能导致切片质量下降，影响实验结果或诊断的准确性。
%蔗糖+OCT(1：1）包埋，定位，置于干冰里冷冻，再放在-80度冰箱，保存待切。
用甘油和双蒸水1：1配好，在-20度冰箱放一个星期荧光切片保存条件为用甘油和双蒸水1：1配好，在-20度冰箱放一个星期。
正常情况下我们都是放在冰箱里面进行冷藏保存，适当的时候可以使用水进行浸泡，然后再切出来，这样丝毫不会影响它的口感，味道也会比较鲜美。
可以。冰冻切片是现包现切的，包埋完毕之后在切片机里冻30min左右即可切片，一般是能切多少就包多少，如果实在切不完，可以拿铝箔包起来，保存于-20度冰箱，要切的时候取出来，在切片机内冻15～30min后再进行切片。
多聚甲醛固定后组织膨胀的原因
多聚甲醛之所以能够起到很好的固定效果，和它的制作工艺、物理性质和化学性质是分不开的。
固定过度：多聚甲醛是一种有效的细胞固定剂，但过度固定可能会导致组织结构变形或收缩。这可能会影响对组织结构和功能的观察和研究结果。 抗原失活：在多聚甲醛中泡久了可能会影响某些抗原的免疫反应性。
在这里应该想到做western blot时用5%脱脂乳粉封闭，原因之一是为了将NC膜或PVDF膜上的未能结合蛋白的孔隙封闭住，防止二抗结合到孔内造成背景色，原因之二就是封闭其他的可能会与一抗结和的杂蛋白。
根据查询多聚甲醛产品使用说明得知，使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48小时，固定时间太久组织会变脆，如果是在温度4度以下最多可以放一个月，所以植物根茎组织不可以一直放在4%多聚甲醛里固定保存。
多聚甲醛固定液主要由水、凝胶和多聚甲醛组成，多聚甲醛有自组装的能力，因此形成均匀的一层膜，分子量大小的多聚甲醛分子以及脂肪酸酯成分可形成多层的涂层，从而减少不必要的反应，提高检测敏感度。
2022-03-07冰冻切片免疫染色
取材：尽量半小时内完成，因为动物死后半小时蛋白酶开始发挥作用。
样本的处理：在制备冷冻切片前，需要采集样本并进行适当的处理。一般情况下，组织样本需要被迅速取出并固定在特定的缓冲液中，避免组织受损或脱离。此外，为了保证冰冻切片的质量，还需要尽可能避免样本的冷却时间过长。
需要。冰冻染色不烤片容易导致在染色过程中切片脱落，影响染色的结果，因此需要烤片。
不会。 冰冻切片染色后置于-20度保存，保存时间最长能达到30天，因此冰冻切片染色十天不会变质。冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。
组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。
小鼠脑冰冻切片的染色实验目的是进行免疫染色或原位杂交等，实验原理它是在低温条件下将生物组织快速冰冻至一定硬度后进行恒温冰冻切片。
求免疫组化冰冻切片荧光染色具体流程
1、当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后)，计时1~2分钟，然后将压力锅端离热源，冷水冲至室温后，取下气阀，打开锅盖，取出切片，蒸馏水洗后，PBS洗2分钟×3，下接免疫组化染色步骤。
2、冰冻切片4~8mm，冰冻切片后如不染色，必须吹干，储存低温冰箱内，或进行短暂预固定后储存冰箱内保存。室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。PBS洗，5分钟×3。
3、一 免疫组化（SP法）操作步骤1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行缓冲液洗 3min/2 次。
4、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。
5、冷冻切片 取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上冰冻，用吸热器压住组织，至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片（1~3分种）。
6、· 切片在作免疫组化染色前，先经预处理使抗原再现(抗原修复)。· 戊二醛：– 穿透性强，微细结构保存好，但对抗原有一定影响，常与其他固定剂联合用作免疫电镜固定液。
请教油红O给细胞染色的详细步骤
1、此为油红饱和液，可长期保存备用。染色步骤：(1)冻切片 (2)蒸馏水充分洗涤。(3)油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：(4)取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。
2、油红O是一种染料，常用作脂肪染色剂，其本身可能有毒性。然而，具体的毒性程度或者对人体的伤害程度并**没有明确的研究结果**。建议您在使用此类化学试剂时注意保护个人安全，遵循相关安全操作规程。
3、需要的其他试剂：异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素（hematoxylin）染色步骤：1． 将冰冻切片(厚度为4-8um)常温干燥15-20min.2． 100%异丙醇孵育5分钟（避免把水带入油红O）。
4、苏丹Ⅲ（Ⅳ）染色方法：（1） 冰冻切片用70％乙醇漂洗，不超过30s。（2） 切片入苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液中3~15min或延长至1h。（3）新50％~70％乙醇分化，直至洗去切片上的浮色为止，蒸馏水洗。
5、油红O染色通常使用普通白光显微镜进行拍照，不需要特殊的荧光技术。在实验过程中，油红O作为一种脂溶剂和染脂剂，比较容易和甘油三酯结合出现小脂滴状，和磷脂结合力较差。
6、标本 人或动物的肝组织等，甲醛—钙液固定，冰冻切片，厚10μm。 改良的油红O染色液 油红O 0. 5g， 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内，且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。
以上内容就是解答有关冰冻切片荧光染料染色流程的详细内容了，我相信这篇文章可以为您解决一些疑惑，有任何问题欢迎留言反馈，谢谢阅读。
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